Справочник Болезни и вредители медоносных пчел: 302
В лаборатории смывы разливают в стерильные центри-
фужные пробирки и центрифугируют при 2000 об/мин в течение
15 мин. Одну часть полученного осадка высевают в чашки Петри
с мясо-пептонным сывороточным агаром, другую — в две стек-
лянные баночки Флоринского с 30 мл мясо-пептонного сыворо-
точного бульона.
В некоторых случаях вместо смывов берут непосредственно
вощину (от выбранной пачки) по 10 г от каждого листа. Пробы
вощины помещают в стерильные бумажные пакеты, маркируют
соответственно номеру пачки и доставляют в ветлабораторию, где
каждую пробу отдельно помещают в стерильную колбу с при-
тертой пробкой, заливают 50 мл петролейного эфира, ксилола или
серного эфира (работу проводят в вытяжном шкафу), после чего
колбу выдерживают с закрытой пробкой на водяной бане при
температуре 35—50 °С в течение 6 ч. Растворенные пробы воска
центрифугируют при 2000 об/мин в течение 20 мин. Осадок высе-
вают на твердую и жидкую питательные среды так же, как смывы
с поверхности листов вощины. Идентификацию возбудителей
американского и европейского гнильцов, полученных в посевах,
осуществляют в соответствии с существующими методами бакте-
риологической и серологической диагностики названных возбуди-
телей.
Э к с п р е с с — м е т о д и с с л е д о в а н и я вощины на
наличие возбудителя американского гнильца Вас. larvae и спор
Nosema apis (по Костецкому и соавт., 1975). Для исследования
растворяют 2 г вощины в 20 мл хлороформа. Раствор разливают
в 2 пробирки, добавляют по 0,5 мл дистиллированной воды и цен-
трифугируют 10 мин при 3000—4000 об/мин.
Для микроскопического анализа берут материал из слоя,
находящегося между воском и водой, так как в этом месте сосре-
дотачиваются споры возбудителей. Бакпетлей готовят на пред-
метных стеклах мазки, которые исследуют общепринятыми мик-
роскопическими методами. При посеве спор Вас. larvae на
питательные среды, пригодные для культивирования этого возбу-
дителя, роста не наблюдается.
И с с л е д о в а н и е воска. От каждой партии воска
берут в стерильные бумажные пакеты образцы из расчета: от
каждой тонны воска из разных мест партии 10 г. Пробы нумеруют
соответственно партии воска и измельчают, помещая во флаконы,
заливают 100 мл стерильного физраствора, встряхивают на
шюттель-аппарате 5 мин, центрифугируют и осадок высевают на
питательные среды, в 2 пробирки с МПА (рН 6,9—7,2) и в одну —
с агаром Черепова. Первые 2 пробирки, предназначенные для
выделения Вас. larvae и Вас. alvei, нагревают при 98 °С 30 мин
для уничтожения вегетативных форм микробов, третью пробирку
не подогревают, она служит для выделения Strept. pluton. Со-
держимое первой пробирки с МПА после прогревания выливают
в чашку Петри, а во вторую пробирку после охлаждения МПА до
45—50 °С добавляют 10 % стерильной лошадиной сыворотки
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 48-2 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 259 260 261 262 263 264 265 266 267 268 269 270 271 272 273 274 275 276 277 278 279 280 281 282 283 284 285 286 287 288 289 290 291 292 293 294 295 296 297 298 299 300 301 302 303 304 305