Справочник Болезни и вредители медоносных пчел: 295 / Книги о животных / Мир животных.ру

тетрациклина, неомицина и эритромицина) лежит принцип диф-
фузии в агар. Отличие в их определении состоит в использовании
различных тест-культур, сред и буфера.
Для определения с т р е п т о м и ц и н а необходимы:
споры культуры Вас. subtilis, штамм 6633;
среда: раствор панкреатического гидролизата мяса (перевар
Хоттингера), содержащий аминный азот, двузамещенный фосфат
натрия, агар-агар (рН 7,8—8,0);
буферный раствор: '/is M фосфатный буфер с рН 7,8—
8,0 (состоящий из 11,612 г Na2HPO4 и 9,073 г NaH2PO4). Для
приготовления буферного раствора можно использовать соли
калия. Каждую навеску соли отдельно растворяют в 1 л дистил-
лированной воды в мерной колбе, а затем смешивают в соотноше-
нии: 9,5 части двузамещенного фосфата натрия и 0,5 части
однозамещенного фосфата натрия.
Для определения х л о р т е т р а ц и к л и н а требуются:
споры культуры Вас. subtilis, штамм L2;
среда: раствор панкреатического гидролизата мяса (перевар
Хоттингера), содержащий аминный азот; агар-агар; рН среды
6,1—6,2;
буферный раствор цитратно-солянокислый с рН 5,0—5,2.
Для приготовления буфера навеску лимоннокислого трехзаме-
щенного натрия 8,6 г растворяют в 400—500 мл дистиллиро-
ванной воды. В этот же раствор добавляют 5,6 мл соляной
кислоты (плотность 1,18—1,19) и доливают дистиллированной
воды до 1 л. Все перемешивают и проверяют рН.
Для определения н е о м и ц и н а берут:
споры культуры Вас. mycoides, штамм 537;
среда: раствор панкреатического гидролизата мяса, содер-
жащий 33 мг % аминного азота (рН 7,8—8,0);
фосфатный буфер (рН 7,8—8,0).
Для определения э р и т р о м и ц и н а необходимы:
споры культуры Вас. mycoides, штамм НВ;
среда: раствор панкреатического гидролизата мяса, содер-
жащий 33 мг % аминного азота (рН 7,8—8,0);
фосфатный буфер (рН 7,8—8,0).
Техника определения. Стерильные чашки Пет-
ри диаметром 90—100 мм с ровным плоским дном ставят на стол,
отрегулированный по уровню. В расплавленную и затем охлаж-
денную до 45—48 °С среду вносят взвесь спор той культуры, на
какой антибиотик исследуют мед, из расчета 20—30 млн. микроб-
ных тел на 1 мл среды. Среду со взвесью спор разливают по 10 мл
в каждую чашку. После застывания засеянного агара вырезают
на его поверхности на расстоянии около 28 мм от центра чашки
6 луночек тонкослойной стерильной трубкой с внешним диамет-
ром 10 мм. Затем от исследуемой пробы в 3 пробирки берут по
1 г меда. В зависимости от того, какой антибиотик определяют,
испытуемую пробу разводят соответствующим буфером в соотно-
шении 1:5 и прогревают на водяной бане при 60°С в течение