Справочник Болезни и вредители медоносных пчел: 76 / Книги о животных / Мир животных.ру

приготовления убитого кипячением антигена, вторую — для по-
лучения автоклавированного антигена.
Проводят титрование выделенных бактерий по О-антигену
с целью установления энзоотических серотипов при помощи
набора типоспецифических агглютинирующих сывороток. Если
культура Е. coli серологически не типируется набором О-сыворо-
ток, используют другие диагностические сыворотки.
В том случае, когда из гемолимфы выделены бактерии
Э. коли, которые не типируются серологически набором типоспе-
цифических колисывороток, необходимо определить патогенные
свойства кишечной палочки путем постановки биологической
пробы на пчелах. С этой целью используют 2 садка с пчелами (по
100 штук в каждом). Пчел первого садка (контрольный) кормят
сахарным сиропом (1:1), пчел второго садка (опытный) —са-
харным сиропом с культурой Э. коли (1 млрд. клеток в 1 мл).
Пчел в садках содержат 10 дней при температуре 30 °С, ежеднев-
но подсчитывая погибших насекомых. Культуру признают пато-
генной, если наблюдаются признаки болезни у опытных пчел
(вздутие брюшка, пятна экскрементов на стенке садка) и про-
должительность жизни у них сокращается более чем в 2 раза по
сравнению с продолжительностью жизни контрольных пчел.
Положительный диагноз на колибактериоз устанавливают
при выделении из гемолимфы пчел культуры Е. coli и если она
серологически типируется набором типоспецифических колисыво-
роток или не типируется, но вызывает гибель пчел.
Определяют чувствительность выделенных патогенных ки-
шечных палочек к антибиотикам и химиотерапевтическим препа-
ратам, руководствуясь методикой, описанной ниже, для всех
возбудителей.
АСКОСФЕРОЗ. Для микроскопического исследования ис-
пользуют соскоб с поверхности тела пораженных личинок. Не-
большое количество полученного материала помещают на пред-
метное стекло в каплю 50 %-ного водного раствора глицерина
или лактофенола (20 г кристаллического фенола, 16 мл молочной
кислоты и 31 мл глицерина) и рассматривают при малом увеличе-
нии микроскопа с целью обнаружения мицелия и плодовых тел
гриба.
Для подтверждения результатов микроскопического иссле-
дования из патматериала выделяют чистую культуру гриба. Для
этого трупы личинок извлекают из ячеек, помещают в стерильную
пробирку с 2 мл физраствора, вносят туда же 1000 ЕД пеницилли-
на и 1000 ЕД стрептомицина, тщательно растирают и материал
высевают на скошенный сусло-агар или среду Сабуро в пробир-
ках. Посевы культивируют в течение 10 сут при температуре
28—32 °С. На 3—5 сут на поверхности среды появляются белые
пушистые колонии, дающие к 8—10 сут зеленовато-серый налет
на дне и по краям колонии, который образуется при формирова-
нии плодовых тел гриба. Колонии могут остаться белыми в том
случае, если в пробирке будет развиваться мицелий лишь одного