Справочник Болезни и вредители медоносных пчел: 73 / Книги о животных / Мир животных.ру

нуклеазу, мочевину, крахмал; не выделяет индол; не разжижает
желатину; не изменяет молоко.
Для получения культуры от каждой пробы берут по 10 пчел,
помещают их на 30 с в 96 %-ный спирт, затем обсушивают на
стерильной фильтровальной бумаге и вскрывают. Для этого
пчелу пинцетом фиксируют за грудку, стерильной препароваль-
ной иглой удаляют спинное полукольцо со стороны заднего
грудного тергита и из грудных мышц делают посев на среду Эндо.
Одновременно из мышц готовят два мазка на предметных стек-
лах, окрашивают один метиленовой синькой, второй по Граму
и просматривают с помощью иммерсионной системы микроскопа.
Посевы выращивают при комнатной температуре (20 °С). На
МПА бактерии гафнии растут в виде полупрозрачных, круглых,
с ровными краями колоний, легко снимающихся петлей. Из коло-
ний готовят мазки, красят по Граму, микроскопируют и сравнива-
ют с микрофлорой мазков из грудных мышц. Грамотрицательные
бактерии исследуют на подвижность. Подвижные грамотрица-
тельные бактерии пересевают на МПА, а затем делают посевы на
цветной ряд Гисса с глюкозой, лактозой, маннитом, сахарозой
и сорбитом; на среду с цитратом аммония; в две пробирки со
средой Кларка; в МПБ с индикаторными бумажками на индол
и сероводород и на желатину. Посевы бактерий на среде с цитра-
том аммония и в одной пробирке со средой Кларка выращивают
при комнатной температуре, остальные — при 35 °С. С культура-
ми, выращенными на среде Кларка при 35 °С, ставят реакцию
с метилротом, а при 20 °С — реакцию Фогес — Проскауэр на
ацетилметилкарбинол. Желатину охлаждают.
Срок бактериологического исследования на гафниоз пчел
4 дня.
С е р о л о г и ч е с к а я д и а г н о с т и к а гафниоза пчел
основана на постановке реакции агглютинации возбудителя со
специфической сывороткой.
Для постановки реакции агглютинации необходимы:
а) стандартная культура Hafnia alvei (стандартный анти-
ген);
б) гипериммунная сыворотка; ее получают от кроликов, для
этого животному вводят внутривенно выращенную на МПА
суточную культуру возбудителя в концентрации 3—5 млрд. мик-
робных тел в 1 мл 4 раза через 5 дней в следующих количествах:
при первой инъекции — 0,5 мл, второй — 1 мл, третьей — 1 мл,
четвертой — 1,5 мл. Через 7—10 дней после четвертой инъекции
у кролика берут кровь и получают сыворотку; ее можно использо-
вать в течение 10 мес при условии хранения в холодильнике при
температуре 4 °С;
в) нормальная сыворотка кролика;
г) физраствор, содержащий 0,85 % химически чистого на-
трия хлорида и 0,5 % карболовой кислоты;
д) исследуемый антиген — смыв бактериальной культуры,
содержащий 3—5 млрд. микробных тел в 1 мл. Для этого берут