Животные
а
б
в
г
д
е
ж
з
и
к
л
м
н
о
п
р
с
т
у
ф
х
ц
ч
ш
щ
э
ю
я

Справочник Болезни и вредители медоносных пчел: 64

С е р о л о г и ч е с к у ю д и а г н о с т и к у проводят с по-
мощью реакции преципитации, используя ларвейную преципити-
рующую сыворотку или реакцию капельной агглютинации.
Антиген для реакции преципитации готовят из десяти по-
гибших от гнильца личинок, которых помещают в ступку, до-
бавляя десятикратное количество физраствора (15 мл для взрос-
лых и 7 мл для 3—4-дневных личинок), тщательно растирают,
суспензию нагревают на кипящей водяной бане 15 мин и фильтру-
ют через асбестовую вату до получения прозрачного экстракта.
Антигеном для реакции преципитации может служить и про-
зрачный фильтрат выросшей культуры, профильтрованной через
асбестовую вату. Фильтрат разливают по 0,1—0,2 мл в уленгутов-
ские пробирки и подслаивают такое же количество сыворотки
(сыворотки и фильтраты должны быть прозрачными). Реакция
преципитации протекает при комнатной температуре в течение
15 мин. При положительной реакции через 0,5—2 мин образуется
тонкое, нежное, голубовато-матовое кольцо.
Антигены для реакции а г г л ю т и н а ц и и готовят из 5—
10 свежих трупов личинок или «корочек», которые помещают
в фарфоровую ступку и заливают 5—10 мл карболизированного
0,5 %-ного физраствора, измельчают пестиком до получения
суспензии и фильтруют через ватный фильтр. Фильтрат центри-
фугируют 10—15 мин при 1500 об/мин, затем осадок растворяют
в 10—15 мл указанного выше физраствора, нагревают на водяной
бане до 70 °С и в горячем виде фильтруют через бумажный
фильтр. Фильтрат вновь центрифугируют при тех же оборотах,
и из осадка готовят антиген в виде густой взвеси микробов и спор
(10 млрд/мл).
Реакцию агглютинации ставят на предметном стекле: на
один его конец пастеровской пипеткой наносят каплю агглютини-
рующей сыворотки, разведенной физраствором (0,1 мл сыво-
ротки+7,9 мл физраствора), а на другой конец— каплю физра-
створа. В обе капли вносят такое же количество антигена и хоро-
шо смешивают. При положительном результате в течение
10—20 мин в капле с ларвейной сывороткой жидкость просветля-
ется и наблюдается мелкозернистая агглютинация (появляются
белые крупинки). В контрольной капле жидкость остается мут-
ной. Агглютинация в капле с ларвейной сывороткой свидетель-
ствует об американском гнильце.
Ф а г о д и а г н о с т и к у осуществляют с применением лар-
вейного бактериофага. На поверхность чашки Петри с мясо-
пептонным сывороточным агаром шпателем засевают две капли
суточной бульонной культуры и наносят в центр каплю бактерио-
фага. Чашку наклоняют для стока бактериофага, а затем перево-
рачивают ее кверху дном и ставят в термостат на 24—48 ч. В по-
ложительном случае на месте протекания капли фага образуется
полоса, свободная от роста микробов.
Патогенные свойства устанавливают при заражении пчели-
ного расплода или кроликов. В стерильные бактериологические

Страницы: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 48-2 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 259 260 261 262 263 264 265 266 267 268 269 270 271 272 273 274 275 276 277 278 279 280 281 282 283 284 285 286 287 288 289 290 291 292 293 294 295 296 297 298 299 300 301 302 303 304 305