Справочник Болезни и вредители медоносных пчел: 64 / Книги о животных / Мир животных.ру

С е р о л о г и ч е с к у ю д и а г н о с т и к у проводят с по-
мощью реакции преципитации, используя ларвейную преципити-
рующую сыворотку или реакцию капельной агглютинации.
Антиген для реакции преципитации готовят из десяти по-
гибших от гнильца личинок, которых помещают в ступку, до-
бавляя десятикратное количество физраствора (15 мл для взрос-
лых и 7 мл для 3—4-дневных личинок), тщательно растирают,
суспензию нагревают на кипящей водяной бане 15 мин и фильтру-
ют через асбестовую вату до получения прозрачного экстракта.
Антигеном для реакции преципитации может служить и про-
зрачный фильтрат выросшей культуры, профильтрованной через
асбестовую вату. Фильтрат разливают по 0,1—0,2 мл в уленгутов-
ские пробирки и подслаивают такое же количество сыворотки
(сыворотки и фильтраты должны быть прозрачными). Реакция
преципитации протекает при комнатной температуре в течение
15 мин. При положительной реакции через 0,5—2 мин образуется
тонкое, нежное, голубовато-матовое кольцо.
Антигены для реакции а г г л ю т и н а ц и и готовят из 5—
10 свежих трупов личинок или «корочек», которые помещают
в фарфоровую ступку и заливают 5—10 мл карболизированного
0,5 %-ного физраствора, измельчают пестиком до получения
суспензии и фильтруют через ватный фильтр. Фильтрат центри-
фугируют 10—15 мин при 1500 об/мин, затем осадок растворяют
в 10—15 мл указанного выше физраствора, нагревают на водяной
бане до 70 °С и в горячем виде фильтруют через бумажный
фильтр. Фильтрат вновь центрифугируют при тех же оборотах,
и из осадка готовят антиген в виде густой взвеси микробов и спор
(10 млрд/мл).
Реакцию агглютинации ставят на предметном стекле: на
один его конец пастеровской пипеткой наносят каплю агглютини-
рующей сыворотки, разведенной физраствором (0,1 мл сыво-
ротки+7,9 мл физраствора), а на другой конец— каплю физра-
створа. В обе капли вносят такое же количество антигена и хоро-
шо смешивают. При положительном результате в течение
10—20 мин в капле с ларвейной сывороткой жидкость просветля-
ется и наблюдается мелкозернистая агглютинация (появляются
белые крупинки). В контрольной капле жидкость остается мут-
ной. Агглютинация в капле с ларвейной сывороткой свидетель-
ствует об американском гнильце.
Ф а г о д и а г н о с т и к у осуществляют с применением лар-
вейного бактериофага. На поверхность чашки Петри с мясо-
пептонным сывороточным агаром шпателем засевают две капли
суточной бульонной культуры и наносят в центр каплю бактерио-
фага. Чашку наклоняют для стока бактериофага, а затем перево-
рачивают ее кверху дном и ставят в термостат на 24—48 ч. В по-
ложительном случае на месте протекания капли фага образуется
полоса, свободная от роста микробов.
Патогенные свойства устанавливают при заражении пчели-
ного расплода или кроликов. В стерильные бактериологические