Животные
а
б
в
г
д
е
ж
з
и
к
л
м
н
о
п
р
с
т
у
ф
х
ц
ч
ш
щ
э
ю
я

Болезни собак: 184

Целлоидиновые срезы обрабатывают в следующей последовательности: красят 20 мин
гематоксилином Эрлиха; промывают в воде; дифференцируют в 1%-ном солянокислом
спирте; промывают в воде; красят в растворе эозина (1 часть 1%-ного водного эозина и 3
части 96°-ного спирта) 35-48 ч в зависимости от толщины среза; контролируют под
микроскопом; промывают в воде; дифференцируют в щелочном спирте (15 см3 96°-ного
спирта и 2 капли 1%-ного водного раствора едкого натра) 0,5-2 мин в зависимости от
толщины среза; дифференцируют в кислом спирте (15 см3 96°-ного спирта и 2 капли 50%-
ной ледяной уксусной кислоты) – 1-2 погружения; споласкивают в 96°-ном спирте; красят
карболксилолом, ксилолом и бальзамом.
Приготовление краски. Растворяют 4 г гематоксилина в 25 мл абсолютного спирта и
смешивают с 400 мл насыщенного раствора аммиачных квасцов (40 г квасцов на 400 г
дистиллированной воды). Смесь оставляют в открытом сосуде под марлей на 4 дня, затем ее
фильтруют и к фильтрату добавляют по 100 г метилового спирта и глицерина. Краску
оставляют на 2 нед. в колбе, снова фильтруют и хранят в хорошо закрытом темном сосуде.
Наилучшей окрашивающей способностью она обладает через 2 мес после приготовления.
Приготовление мазков и их окраска. На чистое обезжиренное стекло наносят каплю
физиологического раствора. Концом скальпеля, которым сделали соскоб со слизистой
оболочки мочевого пузыря, осторожно касаются капли с таким расчетом, чтобы клетки
постепенно смывались в раствор. Такая осторожность необходима, чтобы не разрушить
протоплазму клеток. Затем шлифованным стеклом делают мазок, высушивают его на воздухе
и фиксируют в метиловом спирте (хуже – этиловый + эфир в соотношении 1:1) в течение 3
мин. Мазки следует оберегать от солнечных лучей. После высушивания их окрашивают.
На мазок, приготовленный несколько дней назад, наливают физиологический раствор
комнатной температуры и оставляют на 20 мин, затем его сливают и сразу же на мазок
наливают гематоксилин Делафильда. Мазки, приготовленные перед окраской,
физиологическим раствором не обрабатывают. Далее препарат подогревают, быстро
проводят его 5-6 раз над слабым пламенем спиртовки, и следят, чтобы пламя не касалось
мазка. Подогретый препарат окрашивают в течение 20 мин. Затем краску смывают
дистиллированной водой и дифференцируют 0,1%-ным раствором соляной кислоты в
течение 2-3 мин в зависимости от толщины мазка. Мазок хорошо промывают водой и в
течение 5 мин окрашивают 1%-ным водным раствором эозина. Потом эозин смывают, мазок
просушивают и исследуют под микроскопом с иммерсией.
Результаты исследования. Ядра клеток окрашены в голубовато-фиолетовый цвет. Если в
эпителиальных клетках мочевого пузыря здоровых собак видны одно или два хорошо
очерченных грибовидных ядрышка, то в клетках больных чумой ядра в большинстве случаев
дегенерированы (кариорексис, реже пикноз).
Протоплазма клеток окрашена в бледно-розовый цвет, а включения – в красный. Как
правило, включения расположены в протоплазме. В одной клетке их может насчитываться от
одного до десяти. Они отличаются полиморфизмом: форма их чаще округлая или овальная,
встречаются серповидные, прилегающие к ядру, как бы выгибаясь по его контуру. Размеры
включений варьируют от самых маленьких зернышек до величины ядра. Они имеют четкие
границы и ровные края.
Внутриядерные включения встречаются реже; окрашены они в розовый цвет и иногда
заполняют почти все ядро.
Для исследования могут быть использованы мочевые пузыри, хранившиеся в
замороженном состоянии. Включения при этом окрашиваются менее интенсивно, чем в
мазках из свежего материала, но достаточно эффективно для постановки диагноза.
В материале, хранившемся в условиях обычного холодильника (4°С), включения хорошо
окрашиваются на 2-3-й день. На 4-й же день клетки разрушаются развившейся микрофлорой,
а включения окрашиваются плохо, неконтрастно. Включения при чуме могут быть
обнаружены и в гистологических срезах из мочевого пузыря, фиксированных в 12%-ном

Страницы: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 104 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255